中ｌ田腐复匿学荣矗２０１５￣，第３ｏ卷，第１ １期 ・基础研究・ 电针对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及 ＭＭＰ－２、ＭＭＰ－９蛋白表达的影响 俞坤强 林如辉 ， 陶静 ， 林浴坤 ， 陈立典。一 ， 摘要 目的：探讨电针神庭、百会穴对局灶性脑缺血大鼠学习记忆的影响，及其可能的机制。 方法：雄性ＳＤ大鼠４５只，随机分为假手术组、模型组、电针组，每组１５只大鼠。模型组、电针组均采用线栓法制备 局灶性脑缺血损伤大鼠模型。电针组电针神庭、百会穴７ｄ。各组在造模后第３天开始采用Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫检测学习 记忆能力；２，３，５一氯化三苯基四氮唑染色法检测大鼠脑梗死的体积；Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ法检测大鼠左侧海马基质金属 蛋白酶一２（ＭＭＰ．２）、基质金属蛋白酶．９（ＭＭＰ．９）蛋白的表达。 结果：同模型组相比，电针组大鼠学习记忆能力改善（Ｐ＜０．０５），脑梗死体积明显减少（Ｐ＜０．０１），海马组织中ＭＭＰ．２、 ＭＭＰ．９蛋白表达降低（尸＜０．０５）。 结论：电针能改善局灶性脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力，其机制可能与抑制ＭＭＰ．２、ＭＭＰ．９蛋白表达相关。 关键词脑缺血；电针；学习记忆；基质金属蛋白酶一２；基质金属蛋白酶一９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１．１２４２（２０１５）．１１－１０９５．０５ 中图分类号：Ｒ７４３－３；Ｒ２４５ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｏｎ ｌｅａｒｎｉｎｇ—ｍｅｍｏｒｙ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ａｎｄ ＭＭＰ一２，ＭＭＰ－９ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｉｎ ｒａｔｓ ａｆｔｅｒ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ／ＹＵ Ｋｕｎｑｉａｎｇ，ＬＩＮ Ｒｕｈｕｉ，ＴＡＯ Ｊｉｎｇ，ｅｔ ａｉｄ／Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｒｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１５，３０（１１）：１０９５－－１０９９ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ａｔ Ｓｈｅｍｉｎｇ（ＢＬ２４）ａｎｄ Ｂａｉｈｕｉ（ＤＵ２０）ｏｎ ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｉｎ ｒａｔｓ ａｆｔｅｒ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ（Ｉ／Ｒ）ｉｎｊｕｒｙ ａｎｄ ｉｔｓ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ． Ｍｅｔｈｏｄ：Ｆｏｒｔｙ－ｆｉｖｅ ｍａｌｅ ＳＤ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｒｎｄｏｍｌａｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｓｈａｍ ｇｒｏｕｐ（ｎ＝１５），ｉｓｃｈｅｍｉａ ｇｒｏｕｐ（ｎ＝１５）ａｎｄ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｇｒｏｕｐ（ｎ＝１５）．Ｔｈｅ ｌａｔｔｅｒ ２ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｍｏｄｅｌｅｄ ａｓ ｆｏｃａｌ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａＪｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ（ＦＲ） ｉｎｊｕｒｙ，ａｎｄ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｇｒｏｕｐ ｒｅｃｅｉｖｅｄ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ａｔ Ｓｈｅｎｔｉｎｇ（ＢＬ２４）ａｎｄ Ｂａｉｈｕｉ（ＤＵ２０）ｆｏｒ ７ ｄａｙｓ．Ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ｂｙ Ｍｏｒｒｉｓ ｗａｔｅｒ ｍａｚｅ，ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ ｗａｓ ｍｅａ－ ｓｕｒｅｄ ｂｙ ＴＴＣ ｓｔａｉｎｉｎｇ ａｎｄ ｉｍａｇｅ ａｎａｌｙｓｉｓ，ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＭＭＰ－２ ａｎｄ ＭＭＰ一９ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔｔｉｎｇ． Ｒｅｓｕｌｔ：Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｉｓｃｈｅｍｉａ ｇｒｏｕｐ，ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｉｍｐｒｏｖｅｄ（Ｐ＜０．０５），ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ ｖｏｌ－ ｕｍｅ ｒｅｄｕｃｅｄ（尸＜０．Ｏ１），ａｎｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＭＭＰ一２ ａｎｄ ＭＭＰ一９ ｉｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０５）ｉｎ ｅｌｅｃ－ Ｗｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｇｒｏｕｐ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃａｔｒｅ ｃａｎ ｉｍｐｒｏｖｅ ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｆｒｏｍ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｉｎ— ｊｕｒｙ ｉｎ ｒａｔｓ，ｗｈｉｃｈ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｏｆ ＭＭＰ一２ ａｎｄ ＭＭＰ－９ ｉｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ． ＤＯＩ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００１—１２４２．２０１５．１１．００２ 基金项目：科技部国际科技合作项目（２０１１ＤＦＧ３３２４０）；福建省自然科学基金项目（２０１５Ｊ０１３３５）；福建省康复技术协同创新中心资助项目 （Ｘ２０１２００４一协同） １福建中医药大学康复医学院，福建福州，３５０１２２；２福建中医药大学中西医结合研究院；３福建中医药大学；４福建康复重点实验 室；５国家中医药管理局中医康复研究中心；６通讯作者 作者简介：俞坤强，男，在读硕士研究生；收稿日期：２０１５—０５—２５ ＷＷＷ．ｒｅｈａｂｉ．ｃｏｍ．ｃｎ １０９５ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＲｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎｏｖ．２０１５，Ｖｏ１．３０，Ｎｏ．１ １ Ａｕｔｈｏｒ。ｓ ａｄｄｒｅｓｓ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｒｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｆｕｊｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｆｕ— ｚｈｏｕ，３５０１２２ Ｋｅｙ ｗｏｒｄ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ；ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ；ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ；ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌ１ｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ一２；ｍａｔｒｉｘ ｍｅ－ ｔａｌｌｏＤｒｏｔｅｉｎａｓｅ．９ 脑卒中是一种严重的神经系统疾病ｕ ，也是世 界上导致死亡的第二大疾病 ，而认知功能障碍作 为脑卒中后常见的一种功能障碍，其发病率高达 １．３模型制备 术前所有实验动物禁食１２ｈ。参照改良Ｌｏｎｇａ 方法 １，制备左侧大脑中动脉闭塞模型。大鼠称重 ６４％ｔ ，常出现学习记忆等领域的受损，且脑卒中伴 有认知障碍的患者，容易发展成痴呆 。因此，早期诊 断并及时干预对脑卒中后认知障碍的患者身心功能 的全面恢复以及预防痴呆有着特别重要的意义。课 题组前期研究表明，电针神庭、百会穴可以改善缺血 性脑卒中后认知功能障碍 ，但机制仍未完全阐明。 基质金属蛋白酶．２（ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ一２， ＭＭＰ．２）、ＭＭＰ．９参与了脑缺血后脑损伤的过程 ， 与脑缺血后的神经元的发生、突触的可塑性以及神 经细胞的死亡、凋亡密切相关 ，而减少细胞的凋 亡，改善脑缺血再灌注后大鼠的学习记忆障碍ｎ”。 本实验采用线栓法制备大脑中动脉闭塞（ｍｉｄｄｌｅ ｃｅ— ｒｅｂｒａｌ ａｒｔｅｒｙ ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ，ＭＣＡＯ）局灶性脑缺血再灌 注大鼠模型，观察电针神庭、百会穴对ＭＣＡＯ大鼠 学习记忆，脑梗死体积，以及海马区ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９ 蛋白表达的影响。 １材料与方法 １．１实验动物 ４５只清洁级健康雄性ＳＤ大鼠，体重（２６０＋２０） ｇ，由福建中医药大学实验动物中心提供（许可证号： ＳＹＸＫ（闽）２００５．ｏｏ４）。大鼠分笼饲养，每笼５只；适 应性喂养１周后，用随机数字表法将大鼠编号，并分 为假手术组（ｎ＝１５）、模型组（ｎ＝１５）、电针组（ｎ＝ｌ５）。 实验过程均严格按照国际动物保护和使用指南的规 定进行。 １．２试剂与仪器 ２，３，５．氯化三苯基四氮唑（ＴＴＣ）：美国Ｓｉｇｍａ． Ａｌｄｒｉｃｈ公司。ＭＭＰ．２、ＭＭＰ一９一抗：Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌ— ｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ公司。３－ａｃｔｉｎ一抗、辣根过氧化物 酶二抗：Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ公司。Ｍｏｒｒｉｓ水 迷宫：中国医学科学院药物研究所。Ｉｍａｇｅ．１ａｂ图像 分析系统：Ｂｉｏ．Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ公司。 后１０％水合氯醛０．３ｍｌ／１００ｇ腹腔注射麻醉。常规去 毛消毒，分离颈总动脉，向上分离出颈内动脉和颈外 动脉主干及分支。结扎颈总动脉近心端及分叉处颈 外动脉，微动脉夹夹闭颈内动脉。然后在颈总动脉 结扎处远端约３ｍｍ处剪一小口，将备好的栓线插入 颈内动脉，撤去颈内动脉血管夹，缓慢推动栓线至大 脑前动脉近端（有少许阻力为止），插入长度１８．０— ２２．０ｍｍ。固定栓线，常规缝合伤口。２ｈ后回将栓线 退回至颈总动脉分叉处，形成缺血再灌注模型。假 手术组大鼠只进行动脉分离的操作，不进行结扎和 插线。整个实验过程中注意动物保暖。 动物苏醒后按Ｌｏｎｇａ评分判断模型是否成功：０ 分，无神经功能缺损体征；１分，不能完全伸展对侧 前爪；２分，向偏瘫侧转圈；３分，行走时向偏瘫侧倾 倒；４分，不能自发行走，意识丧失。评分１—３分者 纳入实验。 １．４干预方法 电针组参考《实验针灸学》取大鼠神庭和百会 穴，使用华佗牌３０号０．５寸毫针，接Ｇ６８０５电针仪， 电压峰值６Ｖ，以针体轻轻抖动为度，疏密波，频率为 １／２０Ｈｚ。每次治疗时间为３０ｍｉｎ，每天同一时间治 疗１次，共７ｄ。于手术后第２天开始治疗，直至动物 被处死。假手术组置于普通笼中饲养，予同等条件 抓取。模型组造模后回笼饲养，予同等条件抓取。 １．５ Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫测试 于术后３ｄ进行，Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫是一个直径为 ２００ｃｍ、高度为５０ｃｍ的圆形水池，水深３０ｃｍ；水温 （２５士２）℃；池壁４个等距离点将水池分为４个象限， 任选一象限在其放置平台，逃逸平台直径为 ６ｃｍ，低于水面１—２ｃｍ，四周的池壁表面光滑整洁， 光线四周对称，水池周围参照物从实验开始到结束 位置保持不变。 １－５．１定位航行实验（ｐｌａｃｅ ｎａｖｉｇａｔｉｏｎ）：定位航行实 中聊腐复区学骠忐２ｏ１５￣，第３ｏ卷，第ｌｌ期 验共历时４ｄ。实验开始前，将大鼠放置于水池中自 由游泳２ｍｉｎ，以适应环境和人的抓握等相关操作。 而后将大鼠按顺时针方向依次由第１象限、第２象 １．７统计学分析 采用ＳＰＳＳ１８．０统计软件进行分析，数据以均 数士标准差表示，多组计量资料，则进行单因素方差 限、第３象限、第４象限入水点顺序面向池壁放入水 中。若大鼠在限定的时间内（９０ｓ）找到平台，并且在 平台上停留的时间达到３ｓ以上，此时认为大鼠找到 平台，此时由计算机记录时间，即为逃避潜伏期（ｅｓ— ｃａｐｅ ｌａｔｅｎｃｙ）。如果大鼠在限定的时间内未找到隐 匿于水中的平台，则将大鼠拖曳至平台上，让其在平 台上停留１０ｓ，此时记录潜伏期计为９０ｓ。 １．５．２空间探索实验（ｓｐａｔｉａｌ ｐｒｏｂｅ）：术后第７天，撤 去平台后，任意选取一入水点将大鼠面向池壁放入 水中，观察并记录在限定的时间内（９０ｓ），大鼠穿过 放置原平台区域的次数。 １．６取材及检测 １．６．１ ＴＴＣ染色：选用ＴＴＣ染色法检测各组大鼠脑 梗死的体积。在大鼠断头取脑后，将取得的脑组织 迅速置于一２０℃冰箱冷冻１ ５ｍｉｎ，至脑组织变硬，而后 将大脑从大脑半球额极到枕极做连续的冠状位切 片，每片厚度约２ｍｍ，切成６片。后将脑片放入ｌ％ ＴＴＣ磷酸缓冲液（ｐＨ＝７．４）后，置于３７℃恒温箱ｌ０— １５ｍｉｎ，并用毛笔不时翻动脑片，以使脑片均匀接触 到染色液，整个过程注意避光。ＴＴＣ因与正常组织 中的脱氢酶反应而呈现红色，而由于缺血组织内脱 氢酶活性下降，故不能与ＴＴＣ反应，使脑梗死组织 呈苍白色。利用Ｉｍａｇｅ—Ｐｒｏ Ｐｌｕｓ ６．０分析软件对脑 梗死面积以及大脑面积进行计算，然后得出脑梗死 体积百分比 ３１＝（梗死面积和￣２ｍｍ）／（全脑面积和× ２ｍｍ）。 １．６．２ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ：取左侧海马组织置液氮罐 中速冻，．８０￣Ｃ冰箱保存。取海马组织１００ｍｇ，加裂 解缓冲液ｌｍｌ和苯甲基磺酰氟（ｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏ． ｎｙ ｆｌｕｏｒｉｄｅ，ＰＭＳＦ）１０ｐｌ，充分研磨后离心，取上清。 ＢＣＡ蛋白浓度测定法测定蛋白浓度。样品蛋白变 性后，取样品蛋白５０ｐｇ，１２％ＳＤＳ—ＰＡＧＥ电泳，转移 到ＰＶＤＦ膜，封闭液封闭２ｈ，分别用ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９ （１：５００）、３－ａｃｔｉｎ一抗（１：ｌｏｏｏ）孵育，４℃过夜，用辣根 过氧化物标记的二抗（１：５０００）室温孵育１ｈ。将 ＰＶＤＦ膜放图像扫描仪上，避光配置显色液并覆盖 ＰＶＤＦ膜，Ｉｍａｇｅ ｌａｂ图像分析系统分析。 分析，方差齐者用ＬＳＤ法，方差不齐则用Ｇａｍｅｓ． Ｈｏｗｅｌｌ法。 ２结果 ２．１行为学观察 电针组大鼠平均逃避潜伏期明显短于模型组 （Ｐ＜０．００１）；而穿越平台次数明显多于模型组（Ｐ＜ ０．０５），见表１。 ２．２脑梗死体积 同模型组相比较，电针组的脑梗死体积占全脑 体积的百分比小于模型组，两组差异有显著性意义 （Ｐ＜Ｏ．Ｏ１），见图１。 ２．３蛋白印迹 与模型组相比较，假手术组（Ｐ＜０．０１）和电针组 （尸＜０．０５）海马区ＭＭＰ一２、ＭＭＰ．９蛋白的表达明显较 少，差异有显著性意义，见图２。 与假手术组相比较：①尸ｌ＜０．００１，②Ｐ＜０．Ｏ１ 与模型组相比较：③ Ｏ．００１，④Ｐ＜Ｏ．０５ ３讨论 认知障碍属中医“神”异常的范畴，脑为“元神之 府”，对神明有着重要的作用，而“督脉者，起于 下极之俞，并于脊里，上至风府，人属于脑”，与脑的 功能密切相关，历代医家素有“病变在脑，首取督脉” 之说 。神庭、百会穴，皆为督脉上的在脑部的腧 穴，且为督脉与足太阳之交会穴，具有开窍、醒神之 功，故可以治疗脑卒中后的认知障碍 ¨ 。 认知障碍是一个多领域的受损的疾病 ，而 学习记忆作为其中重要的一个方面，与海马密切相 关。海马作为学习记忆的关键部位，也是脑缺血的 敏感区域ｎ ，当组织缺血时，则会引起海马本身及 其周围神经细胞的死亡或者凋亡，导致学习记忆下 Ｐｌｏｓ Ｏｎｅ，２０１４，９：ｅ８６１ｌ９１．． 一 ［４］林浴坤，陶静，陈斌．电针对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠学 习记忆功能的影响【Ｊ】．中国康复理论与实践，２０１４，（９）：８３１— ８３４． 【５］ Ｆｅｎｇ Ｘ，Ｙａｎｇ Ｓ，Ｌｉｕ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ａｍｅｌｉｏ・ ｒａｔｅｓ ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ｔｈｒｏｕｇｈ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＮＦ－・ｋａｐｐａ Ｂ－－ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｎｅｕｒｏｎａｌ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ・・ｒｅｐｅｒｆｕ－－ ｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｅｄ ｒａｔｓ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｒｅｐｏｒｔｓ，２０１３，７（５）： １５ｌ６＿一１５２２． ［６］Ｙａｎｇ Ｓ，Ｙｅ Ｈ，Ｈｕａｎｇ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｃｕ— ｐｕｎｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｃｏｍｐｕｔｅｒ－ｂａｓｅｄ ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ ｔｒａｉｎｉｎｇ ｏｎ ｐｏｓｔ－ ｓｔｒｏｋｅ ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ：ａ ｓｔｕｄｙ ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｆｏｒ ａ ｒａｎｄｏｍ・ ｉｚｅｄ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｔｒｉａｌ ｏｆ ２ｘ２ ｆａｃｔｏｒｉａｌ ｄｅｓｉｎｇ［Ｊ］．Ｂｍｃ Ｃｏｍｐｌｅ— ｍｅｎｔａｒｙ ａｎｄ Ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１４，１４：２９０． ［７］吴羽楠，张蕴，林如辉．电针对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能 力及ＲｈｏＡ蛋白表达的影响［Ｊ］．中国康复理论与实践，２０１５， （０１）：１７—２１． 【８］Ａｌａｍ Ｍ，Ｓｈｕａｉｂ Ａ．Ｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙ ｉｎ ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓ— ｓｉｏｎ ｏｆ ｔｒｕｎｃａｔｅｄ ｏｒ ｍａｔｒｕｅｄ ｆｏｒｍｓ ｏｆ ＭＭＰ．．２ ａｎｄ ＭＭＰ．．９ ｔｈｒｏｕｌｇｈ ｚｙｍｏｇｒａｐｈｙ ｉｎ ｒａｔ ｂｒａｉｎ ｔｉｓｓｕｅｓ ａｆｔｅｒ ａｃｕｔｅ ｉｓｃｈ－ ａｅｍｉｃ ｓｔｒｏｋｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｍｅｔｈｏｄｓ，２０１３，２１６ （１）：２２＿一２７． 【９】Ｈｅｍａｎｄｅｚ—Ｇｕｉｌｌａｍｏｎ Ｍ，Ｍａｒｔｉｎｅｚ—Ｓａｅｚ Ｅ，Ｄｅｌｇａｄｏ ｅｔ ａ１． ＭＭＰ一２／ＭＭＰ一９ ｐｌａｓｍａ ｌｅｖｅｌ ａｎｄ ｂｒａｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｃｅｒｅ— ｂｒａｌ ａｍｙｌｏｉｄ ａｎｇｉｏｐａｔｈｙ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ ｓｔｒｏｋｅ［Ｊ］． Ｂｒａｉｎ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０１２，２２（２）：１３３—１４１． ［１０］Ｃｈｅｎ Ｗ，Ｈａｒｔｍａｎ Ｒ，Ａｙｅｒ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎ－ ａｓｅｓ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ａｇａｉｎｓｔ ｈｙｐｏｘｉａ－－ｉｓｃｈ－・ ｅｍｉａ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｂｒａｉｎ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ２００９，１ １ １（３）：７２６＿一７３６． 【１１】 Ｌｉ Ｍ，Ｐｅｎｇ Ｊ，Ｗａｎｇ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｐａｓｓｉｖｅ ｍｏｖｅｍｅｎｔ ｉｍ— ｐｒｏｖｅｓ ｔｈｅ ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｃｅｒｅ— ｂｒａｌ ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ ｂｙ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ｎｅｕｒｏｎ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃ— ｕｌａｒ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１４，４９（１）：２１６＿一２２１． ［１２】Ｔａｏ Ｊ，Ｃｈｅｎ Ｂ，Ｇａｏ ｅｔ ａ１．Ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ＮＳＣｓ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ・・ｒｅｐｅｒｆｕ・－ ｓｉｏｎ ｉｎｊｕｒｅｄ ｒａｔｓ ｖｉａ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｔｃｈ ｓｉｎｇａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ 【Ｊ】．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，２０１４，１２４（３）：２Ｏ４— ２１２． ［１３】江一静，杨珊莉，陶静．巨刺法对大鼠脑缺血再灌注损伤的神 经保护机制［Ｊ］＿中国康复医学杂志，２０１４，（０７）：６０５－－６０９． 【１４】Ｌｅｕｎｇ ＭＣ，Ｙｉｐ ＫＫ，Ｈｏ ＹＳ，ｅｔ ａ１．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｕｎｄｅｒｌｙ— ｉｎｇ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｏｎ ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ：ａ ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ ａｎｉｍａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｉｍ— ｍｕｎｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１４，９（４）：４９２＿一５０７． 【１５】Ｋｉｍ ＨＡ，Ｍｉｌｌｅｒ ＡＡ，Ｄｒｕｍｍｏｎｄ ＧＲ，ｅｔ ａ１．Ｖａｓｃｕｌａｒ ｃｏｇｎｉ— 中两腐童区学榘喜２ｏ１５．Ｖ－，第３ｏ卷，第ｌ】期 ｔｉｖｅ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ａｎｄ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ＇ｓ ｄｉｓｅａｓｅ：ｒｏｌｅ ｏｆ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｙｐｏｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ａｎｄ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．Ｎａｕｎｙｎ—Ｓｃｈｍｉｅｄｅ— ｂｅｒｇｓ Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１２，３８５（１０）：９５３－－９５９． ［１６】Ｄｏｌｅｋ Ｎ，Ｓａｙｌｉｓｏｙ Ｓ，Ｏｚｂａｂａｌｉｋ Ｄ，ｅｔ ａ１．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ｖｏｌｕｍｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｕｓｉｎｇ ｍａｇｎｅｔｉｃ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ｉｍ— ａｇｉｎｇ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ，ｖａｓｃｕｌｒａ ｄｅｍｅｎｔｉａ，ｍｉｌｄ ｃｏｇｎｉ— ｔｉｖｅ ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ａｎｄ ｐｓｅｕｄｏｄｅｍｅｎｔｉａ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ— ｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．２０１２．４０（２）：７ｌ７—７２５． ［１７］朱献，张琳，吴小侨．脑缺血大鼠海马ＣＡ１、ＣＡ３区及齿状回 钙神经素的表达与学习记忆损伤的关系［Ｊ］．实用医学杂志， ２０１２，（０３）：３７７－－３８０． ［１８】 Ｃａｏ ＸＺ，Ｍａ Ｈ，Ｗａｎｇ ＪＫ，ｅｔ ａ１．Ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ ｄｅｆｉｃｉｔｓ ａｎｄ ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｔｒｉｇ— ｇｅｒｅｄ ｂｙ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｔｒａｕｍａ ａｒｅ ｅｘａｃｅｒｂａｔｅｄ ｉｎ ａｇｅｄ ｒａｔｓ［Ｊ］． Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏ—Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ＆Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｐｓｙｃｈｉ— ａｔｒｙ，２０１０，３４（８）：ｌ４２６＿一ｌ４３２． ［１９］Ｌｅｏｎａｒｄｏ ＣＣ，Ｅａｋｉｎ ＡＫ，Ａｊｍｏ ＪＭ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｌａｙｅｄ ａｄｍｉｎ— ｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｌｉｍｉｔｓ ｐｒｏ— ｒｇｅｓｓｉｖｅ ｂｒａｉｎ ｉｎｊｕｒｙ ａｆｔｅｒ ｈｙｐｏｘｉａ—ｉｓｃｈｅｍｉａ ｉｎ ｔｈｅ ｎｅｏｎａｔａｌ ｒａｔ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，２００８，５：３４． ［２０］刘丹，王亚春，孙洪英．ＭＭＰ一２、ＭＭＰ一９基因多态性与缺血性 脑卒中临床分型及预后［Ｊ］＿中国实用神经疾病杂志，２０１ ｌ，（Ｏ７）： ３—５． ［２１］祝美珍，苏春寿，吴志敏．清热化瘀Ⅱ号方对大鼠脑缺血再灌 注损伤ＭＭＰ一２及ＭＭＰ一９表达的影响［Ｊ］．中华中医药杂志， ２０１４，（２）：５８２－－５８５． ［２２】 Ｍａｎｓｏ Ｈ，Ｋｒｕｇ Ｌ Ｓｏｂｒａｌ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｖａｒｉａｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ・－２ ｂｕｔ ｎｏｔ ｔｈｅ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ・－９ ｇｅｎｅｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｏｕｔｃｏｍｅ ａｆｔｅｒ ｓｔｒｏｋｅ ［Ｊ］．Ｂｍｃ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，２０１０，１１：４０． ［２３］ Ｗｅｉ ｗ Ｚｈａｎｇ ｗ Ｈｕａｎｇ Ｙ ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＤＬ一３一ｎ—ｂｕｔｙｌｐｈｔｈａｌｉｄｅ ｉｎ ｒａｔｓ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｙｐｏ— ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ａｍｙｌｏｉｄ ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ ｐｒｏ— ｔｅｉｎ ａｎｄ ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ一２［ＪＪ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａ— ｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１２，４０（３）：９６７ ９７５． ［２４］ Ｂａｔｒａ Ａ，Ｌａｔｏｕｒ ＬＬ，Ｒｕｅｔｚｌｅｒ ＣＡ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｐｌａｓｍａ ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ＭＭＰ ｌｅｖｅｌｓ ａｒｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＢＣＳＦＢ ａｎｄ ＢＢＢ ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ ｅｖｉｄｅｎｔ ｏｎ ｐｏｓｔ—ｃｏｎｔｒａｓｔ ＦＬＡＩＲ ａｆｔｅｒ ｅｘｐｅｒｉ— ｍｅｎｔａｌ ｓｔｒｏｋｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｒｅｂｒａｌ Ｂｌｏｏｄ Ｆｌｏｗ ａｎｄ Ｍｅ— ｔａｂｏｌｉｓｍ，２０１０，３０（６）：１１８８一ｌ１９９． ［２５】 Ｋａｓａｉ Ｈ，Ｆｕｋｕｄａ Ｍ，Ｗａｔａｎａｂｅ Ｓ，ｅｔ ａ１．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｄｙｎａｍ— ｉｃｓ ｏｆ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｓｐｉｎｅｓ ｉｎ ｍｅｍｏｒｙ ａｎｄ ｃｏｇｎｉｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１０，３３（３）：１２ｌ—ｌ２９． ［２６］Ｇａｚｚａｎｉｇａ．认知神经科学：关于心智的生物学［Ｍ］．北京：中 国轻工业出版社，２０１ｌ：３１Ｏ一３１２． ＷＷＷ．ｒｅｈａｂｉ．ｃｏｉｎ．ｃｎ ｌＯ９９
