现代农业科技２０１２年第１６期 植物保护学 烟草黑胫病菌拮抗细菌的筛选与鉴定 王栋 伏晓 韩新宇，罗定棋 何余勇 张永辉 雷晓・ （’四川省烟草公司泸州市公司，四川泸州６４６０００； 山东省烟草公司临沂市公司； 中国农业科学院烟草研究所） 摘要 从烟草根际土壤分离到１０７个细菌分离物，通过室内平板对峙培养筛选，筛选到１３株对烟草黑胫病茵有拮抗作用的菌株，其 中，ＬＺ一７菌株的室内平板抑茵效果最好，抑茵圈直径达２７．８２ ｍｍ。经盆栽试验，ＬＺ一７、Ａ３控病作用较好，防治效果分别达５９．１２％￣ｍ ５５．８４％。通过１６ Ｓ ｒＤＮＡ序列测定与分析，Ｌｚ一７与Ｂａｃｉｌｌｕｓｐｕｍｉｌｕｓ的同源性为９９％，初步鉴定证明该菌株属于短小芽孢杆菌。 关键词烟草黑胫病；拮抗细菌；生物防治；筛选；鉴定 中图分类号￥４７６ １ 文献标识码Ａ 文章编号１００７—５７３９（２０１２）１６—０１３３—０２ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ａｎｄ Ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ Ｂａｃｔｅｒｉａ Ａｇａｉｎｓｔ Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｐａｒａｓｉｉｆｃａ ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ ＷＡＮＧ Ｄｏｎｇ ＦＵ Ｘｉａｏ。ＨＡＮ Ｘｉｎ－ｙｕ ＬＵｏ Ｄｉｎｇ－ｑｉ ‘ＨＥ Ｙｕ－ｙｏｎｇ ＺＨＡＮＧ Ｙｏｎｇ－ｈｕｉ ＬＥＩ Ｘｉａｏ （ Ｌｕｚｈｏｕ Ｔｏｂａｃｃｏ Ｃｏｍｐａｎｙ ｉｎ Ｓｉｃｈｕａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｌｕｚｈｏｕ Ｓｉｃｈｕａｎ ６４６０００： Ｌｉｎｙｉ Ｔｏｂａｃｃｏ Ｃｏｍｐａｎｙ ｉｎ Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ； Ｔ０ｂａｃｃｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔｏｔａｌｌｙ １０７ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｓｔｒａｉｎｓ ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｏｂａｃｃｏ ｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅ ｓｏｉｌｓ，ｏｆ ｗｈｉｃｈ １３ ｓｔｒａｉｎｓ ｓｈｏｗｅｄ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔ ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｐａｒａｓｉｔｉｅａ ｖａｔ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ：ＬＺ一７ ｓｔｒａｉｎ ｈａｄ ｔｈｅ ｂｅｓｔ ｒｏｏｍ ｉｆａｔ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｚｏｎｅ ｄｉａｍｅｔｅｒ ｒｅａｃｈｅｄ ２７．８２ ｍｍ． Ｐｏｔ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ＬＺ一７ ａｎｄ Ａ３ ｈａｄ ｂｅｔｔｅｒ ｃｏｎｔｒｏｌ ｅｆｆｅｃｔ ｗｈｉｃｈ ｒｅａｃｈｅｄ ５９．１２％ａｎｄ ５５．８４％．Ｔｈｅ １６Ｓ ｒＤＮＡ ｆｒａｇｍｅｎｔ ｗａｓ ａｍｐｌｉｉｆｅｄ ｆｒｏｍ ｓｔｒａｉｎＬＺ一７ ｂｙＰＣＲ．ａｎｄｔｈｅ １６Ｓ ｒＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔ ｓｔｒａｉｎＬＺ一７ ｓｈａｒｅｄ ９９％１６Ｓ ｒＤＮＡ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｈｏｍｏｌｏｇｙｗｉｔｈＢａｃｉｌｌｕｓｐｕｍｉｌｕｓ． Ｉｎ ｔｈｅ ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ ｒｆａｍｅｗｏｒｋ ｏｆ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ．ＬＺ一７ ｂｅｌｏｎｇｅｄ ｔｏ Ｂａｃｉｌｌｓｕ ｐｕｍｉｌｕｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｐａｒａｓｉｔｉｃａ ｖａｒ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ；ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａ；ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ；ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ；ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ 烟草黑胫病（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｐａｒａｓｉｔｉｃａ ｖａＦ．ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ）是烟 １．２．２黑胫病菌菌谷的制备。将谷子煮至约１／２谷粒开花捞 草生产上最具毁灭性的病害之一，该病传播途径广，发病部 出，装入三角瓶高压灭菌１ ｈ，然后冷却。接种已培养好的黑 位较为隐蔽，生产上应用的品种抗病性较差或综合抗性不 胫病菌种．然后置于２８—３０℃下培养１５～２０ ｄ即可。 足，防治难度大。目前，烟草黑胫病的防治严重依赖化学药 １．２－３ 细菌的分离与纯化。采用平板稀释法［５１，称取混合样 剂，且防治药剂品种较为单一，生产上主用药剂甲霜灵、霜 品１ ｇ及土壤样品５ ｇ加入９９ ｍＬ水中，振荡，静置，取１ ｍＬ 霉威在烟草上已连续多年使用，近年来抗药性问题日益突 上清液与灭菌水进行梯度稀释，制备１０ 、１０ 、１０ 稀释液。 出［１１，导致防治效果不理想，且对环境造成一定程度的污 各取０．１ ｍＬ于培养皿中与选择性培养基混合，置于２９℃温 染。因此，生物防治因其安全、有效等特点而日益受到关注， 箱内倒置培养．３次重复。用接种环将选定的单菌落分别接 筛选稳定高效的拮抗菌成为研究热点之一。国内很多学者开 至ＮＡ琼脂斜面上，菌种纯化后转入斜面，４ ｏＣ保存。 展烟草黑胫病的生物防治研究．筛选出多个对黑胫病菌有 １．２．４根际拮抗细菌的筛选。在燕麦平板４个方向上 较好防治效果的微生物菌株 ］。该研究从烟草根际筛选出 将潜在拮抗菌对称点接，３ ｄ后接种指示菌，２６－２８ ｏＣ下培 拮抗菌株，并进行对烟草黑胫病的防治效果测定，以供参考。 养，３次重复，称之平板对峙培养法嘲。 １材料与方法 １．２．５盆栽试验。将烟株按２５株，盘假植于盛有无菌土的 １．１试验材料 托盘中，７～１０ ｄ后株浇１０ ｍＬ拮抗菌酵液１００倍液（３ｘｌ０７ 供试烟草品种：小黄金１０２５，感黑胫病。供试烟草黑胫 ｃｆｕ／ｍＬ），后接种菌谷（打２ ｃｍｘ３ ｃｍ孔，距离烟株２ ｃｍ左 病菌：０号生理小种，由烟草行业病虫害监测与综合治理重 右，丢人菌谷０．５ ｇ，用土盖好），３、７ ｄ后再浇施２次拮抗菌 点实验室提供。供试烟草根际土壤：取样于四川麻城、山东 酵液，用量及浓度与第１次相同。后选择抑菌带在６ｍｍ以 即墨、四川古蔺等地，共３Ｏ份，置于５℃冰箱保存，备用。 上菌株进行室内盆栽试验，共设５个处理，分别为ＬＺ一７、 供试试剂：Ｍａｒｋｅｒ、１６ Ｓ ｒＤＮＡ片段扩增、ｄＮＴＰｓ、内生 Ａ１、Ａ２、Ａ３、ＹＪ１菌株，娴株按２５株／盘假植，以空白作对照 细菌ＤＮＡ提取、Ｂｕｆｆｅｒ（上海索菜宝生物科技有限公司生 （ＣＫ，仅ＮＢ培养基），观察菌株对烟草生长的影响。 产）、国产分析纯。供试培养基：拮抗细菌分离和培养用ＮＡ、 １．２．６拮抗凶ＩＪＺ一７的１６Ｓ ｒＤＮＡ鉴 Ｉ｝的 训少鉴定菌株 液体培养用ＮＢ、烟草疫霉培养用ＣＡ。 的分类地位同，扩增引物设计为５ 以ＧＡＧＴＴＴＧＡＴＣＣ ＴＧＧＣＴＣ １．２试验方法 ＡＧ一３及５＇－ＴＡＣ ＣＴＹ ＧＴＩ＂ＡＣＧ ＡＣＴ Ｔ一３（根据原核微生物 １．２．１烟草黑胫病菌的培养。将２０ ｇ燕麦片溶于１ ０００ ｍＬ去 １６ Ｓ ｒＤＮＡ保守序列）。ＰＣＲ反应体系（５０ Ｌ）为：Ｔａｑ酶０．６ 离子水中，煮１ ｈ后用３层纱布过滤，滤液定容至１ ０００ ｍＬ， Ｌ，１０ｘＢｕｆｆｅｒ（Ｍｇ２ ）５ Ｌ，ｄＮＴＰ（２．５ ｍｍｏｌ／Ｌ）４ ｔｘＬ，弓ｌ物各 加入琼脂１７ ｇ，１２１℃灭菌２０ ｍｉｎ，即成为燕麦培养基，接种 １ ｔｒＬ，模板２ ＩｘＬ，ｄｄＨ２０ ３６．４ ＩｘＬ。ＰＣＲ反应条件为：９４ ｏＣ ４ ｍｉｎ， 黑胫病菌，２６℃培养３ ｄ，备用。 ９４℃３０ ｓ．５２℃３０ ｓ，７２ ｏＣ １ ｍｉｎ，３０个循环，７２℃延伸２０ 基金项目 泸州市烟草公司科技项目。 ｍｉｎ。用１％琼脂糖凝胶对ＰＣＲ扩增产物进行电泳检测，ＤＮＡ 作者简介王栋（１９７８一），男，安徽临泉人，助理农艺师，从事烟草生产 片段的回收采用ＴａＫａＲａ的ＤＮＡ凝胶回收试剂盒。 技术研究工作。 通讯作者 １．３调查内容与方法 收稿日期 ２０１２—０６—２８ １．３．１抑菌效果。１．２．４试验４ ｄ后，采用十字交叉法测量抑 １３３ 植物保护学 菌圈直径，并观察抑菌圈透明程度和边缘整齐程度。 １－３．２对烟草黑胫病的防治效果。接种１４ ｄ后观察烟株的 发病情况，其分级标准参照中华人民共和国烟草行业标准 （ＹＣ／Ｔ３９－－１９９６）规定执行。 １．３．３菌株的分类鉴定。将测得１６ Ｓ ｒＤＮＡ全序列提交Ｇｅｎ— ｂａｎｋ（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｌｈ．ｇｏｖ），应用其中的ＢＬＡＳＴ软件和 ＤＮＡＭＡＮ软件进行分析。以拮抗菌株的１６Ｓ ｒＤＮＡ序列为基 础。利用软件ＭＥＧＡ ５构建系统发育树。 ２结果与分析 ２．１烟草根际细菌的分离与平板抑制作用结果 该试验从３０份土壤样品中。共分离到１０７个细菌分离 物。以烟草黑胫病菌１６２作为靶标菌，共筛选到１３株对烟 草黑胫病菌有一定拮抗作用的菌株，占总菌株数的１２．１５％。 其中以菌株ＬＺ一７、Ａ１、Ａ２、Ａ３、ＹＪ１ Ｂ２、ＣＩ菌株的抑菌圈最 大，均能达到２５ ｍｍ以上，具体如图１所示。基于该研究的 目的，选取这７个菌株作进一步的研究。 § 圃 楹 案 菌株 图１不同菌株对烟草黑胫病菌的抑制作用 ２．２拮抗根际细菌对烟草黑胫病的防治效果 选取５个对烟草黑胫病菌有拮抗作用的菌株（ＬＺ一７、Ａ１、 Ａ２、Ａ３、ＹＪ１）进行盆栽试验，其对烟草黑胫病的防治效果如 表１所示。可以看出，各处理在接种烟草疫霉１４ ｄ后均不同 程度的发病，５个根际细菌菌液浇灌处理的防治效果为 ４ＪＤ．９８％～５９．１２％，其中以ＬＺ一７和Ａ３表现最好，防效分别为 ５９．１２％和５５．８４％，与其他处理差异达显著性水平。由此表 明：Ｌｚ一７和Ａ３对烟草黑胫病具有较好的防治效果，具有潜 在的应用价值。 表１不同处理对烟草黑胫病室内防治效果 ２．３拮抗菌ＬＺ一７菌株的１６ Ｓ ｒＤＮＡ鉴定 以菌株Ｌｚ一７基因组ＤＮＡ作为模板，进行ＰＣＲ扩增，经 １％琼脂糖凝胶电泳检测，得到１．２ ｋｂ左右的特异性条带．如 图２所示。将Ｌｚ一７的１６ Ｓ ｒＤＮＡ的ＰＣＲ扩增产物测序．进 行校对、剪切和拼接，最终获得全长１ ４５５ ｂｐ序列。用ＢＬＡＳＴ 程序将得到序列与Ｇｅｎｂａｎｋ里收录的细菌１６ Ｓ ｒＤＮＡ序列 进行比对，结果表明，在前１００个序列中有９６个是芽孢菌 １３４ 现代农业科技２０１２年第１６期 １ ２００ｂｐ １ ２ 图２菌株基因组ＤＮＡ电泳图 注：１一ＤＮＡ Ｍａｒｋｅｒ；２－－ＬＺ一７基因组ＤＮＡ。 属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）菌株，同源性在９９％以上。以１６ Ｓ ｒＤＮＡ同源性 为基础。在选取同源性最高的ｌ１个不同种的细菌，利 用ＭＥＧＡ ５进行分析，做出系统发育树，如图３所示。ＬＺ一７ 的系统发育树显示，在这些细菌中，Ｂａｃｉｌｌｓｕ ｐｕｍｉｌｕｓ与Ｌｚ一７ 在同一分支上。说明拮抗菌ＬＺ一７与短小芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｓｕ ｐｕｍｉｌｕｓ有相近的亲缘关系。 Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｏｊａｖｅｎｓｌｓ ＡＢ０２１ １９１ Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈｄｏｔｏｌｅｒｏｍ ＡＪ６２０３６８ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ Ａ肼４９７Ｏ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｖｄｌ／ｓｍｏｒｔ／ｓ ＡＢ０２１ １９８ Ｂａｃｉｌｌｓｕ￣ｎｙｌｏｌｉｑｕｃｆａｃｉｅｎｓ ＡＢ２５５６６９ ＥＵｌ９４８９７ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ ＣＢＭＢ２０５ Ｂａｃｉｌｌｓｕ ａｔｒｏｐｈａｃｕｓ ＡＢ０２１１８１ ＬＺ一７ Ｂａｃｉｌｌｓｕ ｐｕｍｉｌｓｕ ＡＢＲＸ０１０００００７ Ｂａｃｉｌｌｓｕ ｓｔｒａｔｏｓｐｈｅｒ／ｃｕｓ ＡＪ８３１８４１ Ｂａｃｉｌｌｓｕ ａｌｔｈｕｄｉｎｉｓ ８３１８４２ Ｂａｃｉｌｌｓｕ ａｅｒｏｐｈｉｌｓｕ ＡＪ８３１８４４ 图３菌株ＬＺ一７系统发育树 ３结论与讨论 从根际土壤中分离、筛选得到对烟草黑胫病菌抑制效 果明显的拮抗菌株，这些拮抗菌株很有可能具有大田应用 价值．这为以后开发防治烟草黑胫病的微生物菌剂提供了 必要的理论和物质基础。通过试验发现，筛选得到的平板抑 菌效果好的拮抗菌株在温室盆栽控病试验中也呈现出较好 的抑菌效果。因此，通过平板对峙培养法初筛、生长速率培 养法复筛和拮抗菌对盆栽烟草黑胫病的防治效果测定， 可以合理有效地筛选得到有良好研究和应用潜力的拮抗 菌株。该试验中得到对烟草黑胫病拮抗作用稳定并且在盆 栽试验中抑菌效果明显的拮抗菌株是ＬＺ一７和Ａ３。防治烟 草病害方面的根际拮抗细菌主要有Ｂａｃｉｌｌｓｕ ｓｐｐ．、Ａｇｒｏｂａｃ— ｔｅｒｉｕｍ ｓｐｐ．和Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｐ．等。芽孢杆菌能够控制许多作 物和蔬菜的细菌和真菌土传病害，并且对植物的生长有一 定的促生作用ｐ－ｓ１，它能够产生芽孢，耐热抗逆性强，还可产 生多种抗菌物质，较稳定，易产业化。因此，芽孢杆菌用于生 物防治受到了人们的好评［９１。经分子生物学初步鉴定，菌株 ＬＺ一７属于短小芽孢杆菌ｎｏ＿・６１。因此，该菌株有良好的研究和 应用前景，其防病促生机理，实用发酵条件和大田应用效果 （下转第１４１页） 智亚楠：信阳地区水稻主要病害的危害特点及防治措施 位、品种、环境条件等有所差异，常导致植株不能抽穗，扬花 灌浆受阻，秕粒增加，病株茎秆软弱易倒伏。 ５．２防治措施 ６．２防治措施 该病是由种子传播为主的病害，因而建立无病留种田， 选留无病种子和做好种子处理是防治关键。种子消毒处理 可用１％石灰水澄清液浸种或用２％闷种３ ｈ；也可 防治白叶枯病时注意选用抗性较好的品种，并注意品 种的合理布局，不断更新品种。育秧时选择无病种子育秧． 可用中生菌素浸种。肥水管理要做到排灌分开，浅水勤灌： 要施足基肥，早施追肥。药剂防治，发现发病中心应立即喷 药封锁，防止扩散蔓延，目前防治效果较好的药剂有叶青 双、叶枯灵、中生菌素、农用链霉素、宁南霉素等，其中叶青 用多菌灵、甲基硫菌灵、恶霉灵、咪鲜胺等药剂浸种或拌种。 必要时可在秧田喷洒恶霉灵４ ０００倍液 。 ７参考文献 ［１］刘祥臣．构建河南省水稻主产区粮食生产新平台的实践与思考 现 代农业科技，２００８（２４）：２１０—２１２． 双内吸性较强，发病后使用有良好的治疗效果。 ６水稻恶苗病 【２】蒋晓荚，张致力，陈旭，等．稻瘟病无害化防控技术研究进展『Ｊ１．江西 农业学报，２００９，２１（３）：１２１—１２３，１３５． ６．１危害特点 【３］李涛，路雪君，廖晓兰，等．水稻纹枯病的发生及其防治策略［Ｊ］．江西 农业学报。２０１０（９）：９１—９３． 【４】董金皋．农业植物病理学ＩＭ］．北京：中国农业出版社，２００１：２－１６． 【５】章烈辉，刘占山，肖启明，等．我国水稻病虫害综合防治技术研究现状 及发展建议叨．中国稻米，２００９（１）：６—９． 恶苗病又称“徒长病”，苗期到抽穗期均可发生。苗期 发病，病株徒长，呈黄绿色，常在插秧前后死亡。成株期发 病，表现为植株分蘖少或不分蘖，节间长度显著加大，基部 着生倒生须根，近地面病部产生淡红色或白色粉状物。重 【６］薛春梅，潘正艳，吕国光，等．水稻稻曲病的发生与防治『Ｊ］．吉林农业： 学术版，２０１１（９）：８１． ［７】郭祯，柳世君．信阳市水稻生产现状与发展对策【ＪＪ．河南农业科学， ２００４（９）：１７—１９． 病株多在孕穗期枯死，轻病株常提早抽穗，穗形短小或籽粒 不实。 （上接第１３４页） ［８】李存芝．水稻病害的发生与防治［Ｊ】．现代农业科技，２０１２（２）：１６７，１６９． ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ［Ｊ］．Ａｃｔａ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｈｕｎｇ，２００９， ５６（３）：２６３－２８４． Ｉ９】ＭＯＲＲＩＳＳＥＹ ＪＰ，ＤＯＷ ＪＭ，ＭＡＲＫＧＬ，ｅｔ ａ１．Ａｒｅｍｉｃｒｏｂｅｓ ａｔｔｈｅ ｒｏｏｔ ｏｆ ａ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｔｏ ｗｏｄｄ ｆｏｏｄ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｒａｔｉｏｎａｌ ｅｘｐｌｏｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ 等还需进一步研究。 ４参考文献 ［１］李梅云，祝明亮．烟草黑胫病菌对甲霜灵的抗性测定【ＪＪ．中国农学通 报，２００６，２２（９）：３７７—３７９． 【２王晶晶，２Ｊ蒋士君，常淑娴，等．两株生防菌对烟草黑胫病的抑制活性 及其鉴定ＩＪ１．中国烟草学报２０１１，１７（６）：８９—９３． ［３】曹，冉炜，杨兴明，等．烟草黑胫病拮抗菌的筛选及其生物效应 ｆＪ］．土壤学报，２０１１，４８（１）：１５１—１６０． 【４１马冠华，周常勇，肖崇刚，等．烟草内生细菌Ｉｔｂ５７的鉴定及其对烟草 黑胫病的防治效果ＩＪ１．植物保护学报，２０１０，３７（２）：１４８—１５３． 【５】方中达．植病研究方法［Ｍ］．北京：中国农业出版社，１９９８． 【６方敦煌，顾金刚，李江涛，等．烟草黑胫病菌的拮抗根际细菌的筛选 ６］［Ｊ１．云南农业大学学报，２００１（１６）：９３—９５． 『７１ ＫＥＮＮＥＤＹ Ｉ Ｒ，ＣＨ０ＵＤＨＵＲＹ Ａ Ｔ Ｍ Ａ，ＫＥＣＳＫＥＳ Ｍ Ｌ．Ｎｏｎ—ｓｙｍｂｉｏｔｉｃ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｄｉａｚｏｔｒｏｐｈｓ ｉｎ ｃｍｐ—ｆａｒｍｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍｓ：Ｃａｎ ｔｈｅｉｒ ｐｏｔｅｎｔｉａｌｆｏｒ ｂｅｔｗｅｅｎ ｍｉｃｒｏｂｅｓ ａｎｄ ｐｌｎｔａｓ ｃａｎ ｈｅｌｐ ｔｏ ｔｒａｎｓｆｏｒｍ ａ ｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．ＥＭＢＯ Ｒｅｐ，２００４，５（１０）：９２２－９２６． ［１Ｏ】伏晓．烟草黑胫病生防菌剂的研制［Ｄ】．北京：中国农业科学院， ２０１１． ［１１］王静，常平，孔凡玉，等．拮抗细菌ＡＲ０３在烟草根部及根际土壤中 的定殖与鉴定『Ｊ］．中国烟草科学，２０１０，３１（３）：４５—４８，５３． ［１２】何莲．烟草赤星病菌拮抗菌的筛选及应用研究［Ｄ】．长沙：湖南农业大 学，２００６． 【１３］王邱，刘堂将，史永丽．烟草黑胫病的综合防治技术探讨［Ｊ】．中国科 技博览，２０１２（７）：２８３． ［１４】李勇，张定志．利用保健栽培技术防治烟草黑胫病的研究［Ｊ］．现代农 业科技，２０１１（２４）：１８３，１８８． ［１５］陈泽斌，夏振远，雷丽萍，等．烟草黑胫病拮抗内生细菌的分离、鉴定 及防效测定ｆＪ］．中国烟草学报，２０１ １，１７（６）：９４—９９． ［１６】彭丽娟，丁海霞，葛永怡．贵州省烟草黑胫病菌的交配型及其分布初 探 河南农业科学，２０１１，４０（１１）：９３—９６． ｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈｐｒｏｍｏｔｉｏｎｂｅｂｅｔｔｅｒｅｘｐｌｏｉｔｅｄ［Ｊ］．ＳｏｉｌＢｉｏｌＢｉｏｃｈ，２００４，３６（８）： １２２９—１２４４． 【８】ＺＡＩＤＩ Ａ，ＫＨＡＮ Ｍ Ｓ，ＡＨＥＭＡＤ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｐｌａｎｔ ｇｒｏｗｔｈ ｐｒｏｍｏｔｉｏｎ ｂｙ （上接第１３５页） 起来的一项增产新技术。种子包衣剂，内含成膜剂和各种杀 虫剂、杀菌剂、微肥、植物生长调节剂等成分。通过拌种，将 ｋｇ／ｈｍ ，而ＣＫ１为４ ９５０ ｋｇ／ｈｍ ，增产幅度大，经济效益显著， 增收达９００～２ ７００元／ｈｍ ，而投入不超过７５元／ｈｍ 。 ３结论与讨论 ３．１结论 其包被在种子表面上。能迅速固化成膜，在土壤中透气透 水．不影响种子的发芽，且又极难溶解失效，从而使包衣剂 中的各种有效成分缓慢释放出来，并保持较长的有效期，从 而达到促进小麦生长发育、防治病虫害，提高产量的目的。 ３％敌委丹的特点为内吸性强，有效期长；杀菌范围广，药 效好；操作简单，使用方便；安全性好，早出苗，出壮苗，促进 分蘖［５１。 ４参考文献 【１］贾洪涛，曹善东，杜立树．，Ｊ、麦专用复方抗旱型浸种剂和包衣剂抗旱 机理的初步研究［Ｊ］．麦类作物学报，２０１０（３）：５１－５４． ［２］李洪山，李宏阳，李慈厚．大麦种子处理及药剂的选择［Ｊ】＿大麦科学， １９９７（４）：２９－３１． 全场大面积试验示范调查表明，３％敌委丹悬浮种衣剂 对种子安全，没有发现药害现象或影响出苗的情况，而且超 剂量使用也不形成药害。３％敌委丹悬浮种衣剂除对条纹病 有极好的防治效果之外，对大麦根腐叶斑病、大麦纹枯病也 有较高的防治效果，杀菌谱较广。其还对大麦生长有～定的 刺激作用，并且能使出苗提前１～２ ｄ，大麦出苗后叶色浓绿、 叶片肥厚，苗齐、苗壮，生长势好，生长发育整齐。使用方 法可用机械包衣。也可用手工包衣 。使用成本低，投入产出 比高。 ３．２讨论 【３】薛国屏，柳伟祥．大麦种子包衣的防病虫增产效应［Ｊ】．宁夏农林科技， １９９５（１）：１２－１３． 种子包衣技术是在传统浸种、拌种技术的基础上发展 【４］全红英，陶秀华．种衣剂使用技术【ＪＪ．农村科学实验，２０１２（３）：１３． 【５］孙传宏．高效种衣剂——好年冬［Ｊ］．科技致富向导，２０１１（２８）：２８． １４１
