维普资讯 http://www.cqvip.com 还研究了对发育成棒状的１年生苗木进行修 枝或切芽处理而发生侧枝的品种间差异。结 果证明，用圆叶海棠作为砧木育成中间砧木 苗，然后再利用这种中间砧木苗进行育苗时， 芳明和Ｒａｋｕｒａｋｕ—ｆｕｊｉ品种平均发生了５—８ 根侧枝，Ｓｈｉｎａｎｏ—ｒｅｄ和秋映品种发生的侧枝 Ｒａｋｕｒａｋｕ—ｆｕｊｉ品种的一年生苗木进行修枝、 切芽和施用苄基腺嘌呤后，研究了由此而引 起的侧枝形成效果。结果查明，这些处理组 合使Ｒａｋｕｒａｋｕ—ｆｕｊｉ品种的２年生树苗平均 形成了１５根分叉角度大的侧枝，能够育成树 冠为圆锥形的２年生苗木。 数很少，平均在０．３—１．３根之间；Ｓｈｉｎａｎｏ— ｓｗｅｅｔ和Ｓｈｉｎａｎｏ—ｇｏｌｄ品种发生的侧枝数在 ２．５ ３．６根之间。此外，对发育成棒状的 谢国禄译自园芸学会杂志７Ｏ（５）：６０２— ６０６，２００１ 大豆单个染色体的显微解剖和微型克隆文库的建立 Ｙｉｈｕａ Ｚｈｏｕ，Ｂｅｎｙｕａｎ Ｄａｎｇ等 染色体ｌ显微解剖和微型克隆法是在 １９８１年提出的，这项技术是将目标染色体或 染色体片段进行解剖，然后克隆解剖的染色 体，建立特定染色体的微型克隆文库。作为 项染色体组研究上快速发展的技术，现已 一在我们的研究中，采用了玻璃针和连接 物匹配物（ＬＡ）ＰＣＲ解剖单个大豆染色体和 进行微型克隆。再将解剖染色体进行体外扩 增。原位杂交显示ＬＡ—ＰＣＲ产物能和有丝 中期的染色体杂交。建立和评估了这个 成为研究人类、动物和植物最有效的工具。 染色体的微型克隆文库，据估计有近一半的 克隆含有中等数量的或很高的重复序列，能 为建立这个基因的基因连锁图提供大量的探 针。经过两轮的由Ｓａｕ３Ａ连接物一匹配介导 的ＰＣＲ后，得到的涂片ＤＮＡ片段为０．３ ２． 已有人利用这项技术成功地建立了清晰度高 的人类、几种动物和植物的文库。为ＲＦＬＰ 分析、标记辅助筛选、有用基因的物理图谱和 有用基因的分离提供了大量的探针。但是， 由于染色体组的复杂性和小型染色体的存 在，至今在大豆上仍无人报道进行过此项研 究。 ５ｋｂ。Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交显示，解剖染色体的ＰＣＲ 产物同大豆基因组ＤＮＡ为同源的。染色体 ＰＣＲ产物与有丝中期的原位杂交显示 ＰＣＲ产物与大豆染色体已杂交，但染色体信 号并不只限于显微解剖染色体。杂交信号颜 色为黄一绿色。显微解剖染色体的第二轮 大豆含４０个小染色体，有人认为大豆是 一个古老的四倍体。因此，多倍体染色体组 有强烈的通过染色体序列的多样化演变为二 倍体的趋势。由于染色体组重复水平高，在 ＰＣＲ产物克隆到质粒载体中，产生特定染色 体的微型克隆文库，包括近２００，０００个重组 克隆。估计有１７８个随机选择克隆在０．３ １．８ｋｂ之间，平均为８３０ｂｐ，其中近４４％的为 探索用染色体组作传统的ＲＦＬＰ探针时，两 个大豆基因型间的染色体组的多态性相对要 比其它作物低。最新的遗传图为３０００ｃＭ （Ｓｈｏｅ ｍａｋｅｒ等），大豆单倍体的２０个连锁组 尚无连锁图。因此，每个大豆染色体的显微 解剖和微型克隆为建立大豆每个染色体的详 细连锁图提供了可能的方法。 高水平／中等水平拷贝克隆，５６％的为低水平 的或独特的拷贝克隆。 邱敦莲译自Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ １２０（３）：１２９—１３５， ２００１ ５７
