引咳实验的实验分析
1、氨水引咳法
将豚鼠置于500mL玻璃钟罩内，通过空气压缩机连接玻璃喷雾头，以400mmHg恒压将氨水（25%~28%氢氧化铵）均匀的喷入钟罩内，喷雾5s，然后观察和记录豚鼠的咳嗽潜伏期和5min内咳嗽次数。也可以引起50%豚鼠咳嗽的喷雾时间为指标。典型咳嗽为豚鼠腹肌收缩，同时张大口，有咳嗽声。另有简易浓氨水引咳法，取一只50mL烧杯，盛满90~100℃的水，上面盖蒸发皿。实验时，用胶头滴管滴4滴浓氨水于蒸发皿上，立即罩上1000mL大烧杯，30s后把实验豚鼠放入1000mL大烧杯中，放入1min后立即取出，置另一1000mL烧杯中，观察和记录小鼠咳嗽潜伏期及5min内的咳嗽次数。
方法评价：该方法操作简便，设备简单，且价廉易得，方法简便，快速，耗药量少，易于掌握。但可以适当调整氨水用量。不过此方法变异性过大，故一般只用于镇咳药的初步筛选。
2、枸橼酸引咳法
取体质量200~250g的豚鼠，置于2~4L容积的密闭钟罩内，用超声雾化器以600mmHg的恒压，通过玻璃喷头喷入17.5%枸橼酸溶液雾化气（要求通过玻璃喷头的气流速度为15L·min-1）。喷雾10s，记录豚鼠咳嗽潜伏期；豚鼠咳声响亮，容易记录，故也可以咳嗽次数为观察指标，恒压喷雾1min，记录5min内咳嗽次数。注意根据具体情况调整喷雾时间；实验前24h对豚鼠预筛，喷雾潜伏期＞2min者或5min内咳嗽次数少于10次者剔除。刘军[4]等采用豚鼠，体质量（250
±80）g，超声雾化法，观察喷雾不同时间（10、20、30、60s）对豚鼠咳嗽潜伏期和次数的影响。结果显示，10s为枸橼酸雾化引咳豚鼠的最佳喷雾时间。而枸橼酸引咳豚鼠的最佳实验条件为：17.5%的枸橼酸在5000mL大烧杯内，以喷雾器的最大喷雾力度喷雾10s，温度保持（20±2）℃，湿度在50%~60%。喷雾后2min反应出现高峰，即咳嗽次数明显增加，之后略有减少。研究结果还表明，豚鼠具有性别差异，雌性豚鼠的潜伏期较雄性豚鼠延长；采用玻璃钟罩喷雾实验状态不佳，咳嗽次数也较少，而5000mL大烧杯实验结果较好。
方法评价：此方法在简便易行的基础上，更加保障了实验的准确性，且提高了可比较性。枸橼酸对样本伤害小，所以可对同一样本反复多次使用，使试验结果更客观。而且实验药品较为廉价，更方便此种方法的推广。
3、辣椒素引咳法
辣椒素主要通过刺激C纤维释放递质，引起咳嗽反射和支气管收缩反应。将350~500g豚鼠置于特制的密闭箱盒内，用超声波雾化器以0.5mL·min-1容量雾化吸入0.03mol·L-1辣椒素2min引咳，计数10min内咳嗽次数（约10~20次）。
方法评价：此方法操作简单，实验结果具有客观性及可比较性。不过辣椒素能引起豚鼠气道的收缩反应，导致豚鼠窒息死亡，在实验时应注意；且辣椒素价格较高，不便于此种方法的推广。
总之，咳嗽的动物实验模型较多，各有其利弊。在动物实验中，咳嗽的发生涉及许多不同的炎性介质，包括缓激肽、组胺、前列腺素等，一些炎性过程可改变气道感觉传入神经的表型和兴奋性，使咳嗽中枢出现可塑性变化。因此，咳嗽模型的成功建立，应注意观
察，模型是否具有良好的重复性及是否能模拟实验疾病咳嗽的发生。[6]而且，目前咳嗽反射机制尚不十分明确，咳嗽反射中枢神经机制尚需进一步研究。故目前动物实验存在不确定性，造模方法尚需进一步完善，相关量化指标及标准化研究尚需进一步进行。
