２０１０年３月第３期 中目民族区药杂志 ４１ 朝药关苍术提取物对无水乙醇致小鼠胃黏膜损伤的影响△ 刘 男。 张颖丽 张善玉 ’ （１．延边大学医学部药学院，吉林延吉１３３０００； ２．延边大学长白山生物资源与功能分子教育部重点实验室，吉林延吉１３３０００） 摘要：目的：通过实验观察研究关苍术的不同提取物对小鼠无水乙醇实验性胃黏膜损伤的保护作用。方法：采用无水乙 醇小鼠急性胃溃疡模型，现察胃黏膜损伤面积，测定胃黏膜组织中一氧化氮（ＮＯ）和前列腺素（ＰＥＧ２）的含量。结果：关苍 术Ｃｏ２一乙醇组、Ｃ０２组和正丁醇组小鼠溃疡指数明显低于乙醇模型组；关苍术ｃ０２一乙醇组和ｃｏ２组小鼠胃组织中 Ｐ（；】 含量及关苍术Ｃ０２一乙醇组ＮＯ含量显著高于乙醇模型组。结论：关苍术不同提取物中Ｃｏ２一乙醇提取部分拮抗无 水乙醇所致小鼠急性胃黏膜损伤作用较好，该作用可能与增加胃黏膜中ＮＯ、ＰＧＥ２含量有关。 关键词：关苍术；无水乙醇；胃溃疡；ＮＯ；Ｉ＇ＧＥ２ 中圈分类号：Ｒ２９１．９ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００６－６８１０（２０１０）０３—０ｏ４ｌ一∞ 关苍术为多年生菊科植物关苍术（Ａｔｒａｃｙｌｏｄｅｓ。ｉａｐｏｍ－ ｃａＫｏｉｄｚ．ｅ口‘．Ｋｉｔａｍ．）的干燥茎根，又名东苍术、头菜。性 味辛、苦，温；归脾、胃、肝经：能燥湿健脾，祛风散寒，明目； 天诚超临界萃取有限公司：Ｄ一１９００型紫外一可见分光光 度计，日本ＨＩＴＡＣＨ工公司生产。 ２实验方法 用于脘腹胀满，泄泻，水肿，脚气痿蹙，风湿痹痛，风寒感 冒，夜盲症等，在临床上广为应用¨Ｊ。在朝鲜族民间经常 把关苍术作为治疗胃溃疡、慢性胃炎及消化系统疾病的药 ２．１关苍术不同提取物的制备 ２．１．１超临界萃取物的制备：取干燥粉碎的关苍术根茎粉 末装入萃取釜，在萃取压力为２５ ＭＰａ，温度为４５℃，ｃｏ２流 量为１４５ ｋｇ／Ｌ的条件下萃取２ｈ，得棕色油状的物质（以下 简称ＣＯ２提取物），得率为４．３％；药渣继续以１．８ｍＬ／ｇ加 入无水乙醇做夹带剂，与前者相同工艺萃取２．５ｈ，萃取得 物回收乙醇并浓缩致浸膏（以下简称ＣＯ：一乙醇提取物）， 得率为１．１％。 物，疗效甚佳。也有实验表明关苍术正丁醇提取物降低乙 酸型溃疡模型、消炎痛型溃疡模型和幽门结扎型溃疡模型 大鼠胃溃疡的溃疡指数，明显降低幽门结扎型溃疡模型胃 蛋白酶活性、胃液游离酸度和总酸度，并增加胃液中ＰＧＦ： 含量【２】。为了进一步探讨关苍术治疗胃溃疡的物质基础， 本实验通过观察关苍术的超临界ｃｏ：、超临界ｃｏ２一乙醇、 正丁醇和水层等不同提取物对无水乙醇致小鼠急性胃黏 膜损伤模型的影响，探讨其拮抗乙醇型胃黏膜损伤的作 用，同时初步确定其有效部位。 ｌ 实验材料 ２．１．２正丁醇和水层提取物的制备：将超临界萃取后的药 渣用水提取，提取液过滤，正丁醇萃取，将正丁醇层和水层 减压回收并浓缩至浸膏，得率分别为０．５７％和２２．３６％。 ２．２关苍术提取物对无水乙醇致小鼠急性胃黏膜损伤的 影响。 １．１实验动物：昆明种小鼠１２９只，雄性，体重（２Ｏ±２）ｇ， ２．２．１ 对胃溃疡面积的影响：取小鼠６０只，随机分成７ 组，每组１Ｏ只，分别为空白对照组、模型组、Ｃｏ２组、ｃ０２一 由延边大学医学部实验动物科提供，动物实验室喂养３天 后开始实验。 １．２药物与试剂：关苍术采集于吉林省汪清县，经延边大 学药学院生药学教研室鉴定为 ．乙醇组、正丁醇组和水层组。给药组灌服相应提取物０．５ ￣Ｋｅ／ｄ（用０．５％ＣＭＣ—Ｎａ和吐温－８０溶解成相应浓度的 混悬液后灌胃）；空白对照组和模型组给予等量的溶有 ０．５％ＣＭＣ－－Ｎａ和吐温８０的蒸馏水。连续给药５天，实验 Ｋｉｔａｍ．的干燥根茎；ＮＯ测定试剂盒（还原酶法）由 南京建成生物工程研究所提供；其他试剂均为分析纯。 １．３实验仪器：ＴＣ—ＳＦＨ－５０—１２０Ｓ超临界萃取仪，沈阳 前禁食不禁水２４ｈ，末次灌胃给药３０ｍｌｎ后，除对照组和阴 性对照组外所有小鼠均灌服无水乙醇，０．２ｍＩ／只，１ ｈ后颈 椎脱臼处死，解剖取胃，结扎胃的贲门部和幽门部并经胃 △基金项目：国家自然科学基金（３ｏｓ６ｏ３４３），延边大学２１１工 程项目（ＸＢ２１１－－２） 壁向胃腔内注入５％甲醛２ｎｄ，将胃取出浸入５％甲醛溶液 中固定待测。沿胃大弯剪开，于４￣Ｃ生理盐水中冲洗，展开 ｙｂｕ．ｅｄｕ．Ｇ－ｎ 通讯作者：Ｅ—ｍｉｌ：￣平铺于显微镜下，用直尺测量溃疡面积，按下列公式计算 ４２ 中国民族医药杂志 胃黏膜愈合的作用。 ２０１０年３月第３期 溃疡抑制率，溃疡抑制率＝［（模型组平均溃疡面积一给药 组平均溃疡面积）／模型组平均溃疡面积］×１００％。 ２．２．２对小鼠胃黏膜组织中Ｎ０和ＰＧＥ含量的影响：取 小鼠６６只，随机分为６组，每组１１只，分别为对照组、模型 组、ｃ（）２组、ＣＯ：一乙醇组、正丁醇组和水层组。给药剂量 和方法同上述实验，末次灌胃给药３０ｒａｉｎ后，除对照组以 外，听有小鼠均灌服无水乙醇，０．２ ｍＬ／只， ｈ颈椎脱臼处 死，解剖取胃，沿胃大弯剪开，生理盐水冲洗，剪取溃疡组 织处，用滤纸吸干水分，称取质量，制备胃组织匀浆液，严 格按照试剂盒说明书测定胃组织中Ｎ０含量：按文献方 表２关苍术不同提取栩对胃黠膜中ＮＯ、ＰＧＥ２的影响（Ｘ￣ＳＤ） 与模型组相比，Ｐ＜０．０５ ＮＯ是由一氧化氮合酶（ＮＯＳ）催化产生的一种神经介 质和信使分子，具有增强胃黏膜保护作用，与胃溃疡修复 之间存在着密切联系。Ｎ０参与调节胃酸和胃黏液的分泌 及碳酸氢盐的生成，可有效地舒张血管，增加胃黏膜血流 量，从而在维持黏膜完整性和黏膜防御中直接发挥作用； 并且ＮＯ对溃疡愈合也有促进作用 】。ＰＧＥ小是胃黏膜中 的主要前列腺素之一，可改善胃黏膜血流，充足的黏膜血 法 测定ＰＧＥ２含量；用考马斯亮蓝法测定蛋白含量。 ２．３统计学处理：所得实验数据用均数±标准偏差（又± Ｓ）表示，两样本均数间比较采用ｔ检验进行统计学分析。 ３实验结果 ３．１不同提取物对无水乙醇致小鼠胃黏膜损伤面积的影 响ＣＯ２：乙醇组、ＣＯ 组和正丁醇组均可明显降低小鼠胃溃 疡指数（Ｐ＜Ｏ．０１），而水层有降低溃疡指数的趋势，但无显 著性差异。结果如表１所示。 表１ 关苍术不同提取物对无水乙醇致小鼠急性胃溃疡的作用 流可迅速清除对上皮屏障具有损伤作用的物质，还为黏膜 细胞提供丰富的氧气和营养物质，对胃黏膜的完整起到重 要的保护作用。本实验中ｃ（）２一乙醇组胃组织ＮＯ含量和 增加ＰＧ 含量都明显增加，提示ｃｏ２一乙醇提取物可能 通过增加ＮＯ的释放，提高胃组织中ＰＧＥ：含量，发挥对胃 黏膜的保护作用。 参考文献 ［１］殷俊芳，黄宝康，吴锦忠．苍术属药用植物的药理作用 ・与模型组相比，Ｐ＜Ｏ．Ｏｌ 研究进展［Ｊ］．第二军医大学学报，２００８，２６（４）：２５２～ ２５４． ３．２不同提取物对小鼠胃组织中ＮＯ和ＰＧＥ 含量的影 响：与模型组比较，Ｃ０２一乙醇组小鼠胃黏膜中ＮＯ含量明 ［２］朴世浩，朴惠善，金德男，等．关苍术正丁醇萃取物的抗 溃疡作用研究［Ｊ］．中草药，１９９６，２７（７）：４１０－－４１２． ［３］于海玲，郭建鹏，．老鹳草对小鼠无水乙醇型胃溃 疡的影响［Ｊ］．时珍国医国药，２０ｏ７，１８（４）：８７４—８７５． ［４］何绍珍，任建林．乙醇对胃黏膜作用机制的研究进展 ［Ｊ］．世界华人消化杂志，２００５，１３（２１）：２５９１－２５９６． 显增加（Ｐ＜０．０５），ｃ０２组和正丁醇组有增加的趋势但无 显著性差异；ｃｏ２一乙醇组和ｃ０：组黏膜中ＰＧＥ２含量明显 增加，与模型组比较都有显著性差异（Ｐ＜０．０５），其他组有 增加的趋势，但不明显。 ４讨论 无水乙醇所致胃溃疡模型是一种急性胃溃疡模型，其 形成机制主要是乙醇直接损伤胃黏膜，引起胃壁血液循环 ［５］李备，刘华蓉，潘永全，等．黄连总生物碱对乙醇致大鼠 胃黏膜损伤的保护作用及其机制探讨［Ｊ］．中国中药杂 志，２００６，３１（１）：５１—５４． 障碍、组织坏死脱落，导致溃疡形成 】。本实验结果表明， 关苍术Ｃｏ２一乙醇组、ＣＯ：组和正丁醇组均减轻无水乙醇 致小鼠胃黏膜损伤，其中Ｃ０２一乙醇组作用最明显。说明 Ｃ０２一乙醇提取物可能具有改善胃壁血液循环，促进受损 ２０１０年１月１５目收稿 Ｓｔｕｄｙ ｏｎ ｔｈｅ ｅｇｇｅｃｔ ｏｆｔｈｅ ｅｘｆｒａｌｔ ｆｒｏｍ Ｊａｐａｎｓｅ Ａｔｒａｅｔｙｌｏｄｅｓ Ｒｈｉ２０ｍｌｏｎ ｔｈｅ ｍｉｄ Ｗｉｈ ｇａｓｔｒｔｉｃ ｆｌｅｅｒ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ａｂｓｏｌｕｔｅ ａｌｃｏｈｏｌ ＬＩＵＮａｎｌ，ＺＨＡＮＧ Ｙｉｎｇ—ｌｉｌ，ＺＨＡＮＧ Ｓｈａｈ—ｙｕ２ Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｙａｎｂｉａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｙａｎｊｉ １３３０００，Ｊｎｉｎ，Ｃｈｉｎａ ２０１０年３月第３期 中国民族区药杂志 ４３ ２．Ｋｅｙ Ｌａｂｏｍｔｏ￣０ｆ Ｎａｔｕｒａｌ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ Ｃｈａｎｇｌｘ￣ｉ Ｍｏｕｎｔａｉｎ＆Ｆｕｎｃｔｉｏｎ￣Ｍｏｌｅｃ￣ （Ｙａｎｂｉａｎ ＵＩＩｉ嘲ｉｔｙ），Ｍｉｍｓｔｒｙ ０ｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｙａｎｊｉ １３３００２，Ｊ曲１，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃ ｖｅ：Ｔｏ ｏｂｓｅ￣ｅ ａｎｄ ｉｎｖｍｆｉｇａｔｅｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔ ｅｆｆｅｃｔ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔ ｆｒｏｍ Ｊａｐａｎｅｓｅ Ａｔｒａｃｔｙｌｏｄ￣Ｒｈｉｚｏｍｅ ｏＲ ｅｘｐｅ￣ ｉｍｅｎｔ￣ｇａｓｔｒｉｃｌｌｌｃｅｒｉｎｄｕｃｅｄｂｙ ａｂｓｏｌｍｅ￣ｃｏｈｏＭｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｇａｓＵ＇ｉｃ ｕＩｃｅｒｗ∞ｉｎｄｕｃｅｄｂｙ ａｂｓｏｌｍｅ￣ｃｏｈｄ，ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｄｔ蛔 ａｒｅａａｎｄｂｅ ｃｏｎｔｅｍ ０ｆＮＯ ａｎｄＰＧＥ２ｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｒｅｓｕｈｓ：Ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉ＆￣ｃｏｈｄｍｎｄｄ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｍｄｅｘ ０ｆｌｌｌｏｅｒｉＩｌＣＯ２一ａｌ＿ ｃｏｂｅｌ ｇｒｏｕｐ，ＣＯ２ｇ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｎ—ｂｕｔａｎｄ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｍａｒｋｅｄｌｙ，ｄ￣ｒｅａｓｃｄ；＆ｅ ｃｏｍｅｎｔ ０ｆＰＧ ｉｎ Ｃ０２一￣ｃｏｈｄ ｇｒｏｕｐ ｎａｄ ＣＯ２ ｇｒｏｕｐ， ｂｅ ｃｏｍｏＲｔ ｄ ＮＯ ｉｒＩ ＣＯ２一￣ｃｏｈｄ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｍａｒｋｅｄｌｙ ｄ￣ｒｅａｓｎｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ＣＯ２一￣ｃｏｈｏｌ ｅｘｔｒａｃｔ ｆｒｏｍ Ｊａｐａｎｅｓｅ Ａｔｒａｃｙｌｎｄｍ Ｒｈｉｚｏｍｅ ｐｌａｙ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｍｌｅｓ ｉｎ ｅｔｈａｎｏｌ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｌｍｉＲｏｓ。Ｔｈｅ ｅｔｔｌｃｔ ｍｉｇｈｔ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｍｃｒｅａｓｅ ＮＯ ａｎｄ ＰＧＥ２． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｔｒａｃｙｌｄｎｅｓ ｊａｐｏｍｃａ Ｋｏｉ＆；ａｂｓｏｌｕｔｅ￣ｃｏｈｄ；ｇａｓｔｉｒｃ ｕｌｃｅｒ ＮＯ；Ｐｃ 八味沉香胶囊对大鼠血栓形成和微循环的影响△ 杨玉梅 覃建民 李月玲 庞海 武宇科 王玉华’ （１．包头医学院心血管研究室，内蒙古包头０１４０６０；２．天津科技大学材料科学与化学工程学院０６级，天津３００４５７； ３．内蒙古医学院药学院，内蒙古呼和浩特０１００５９） 摘要：目的：观察八味沉香胶囊对大鼠血栓形成和微循环的影响。方法：通过ＢＩ一２０００Ｅ医用图象分析仪观察记录大鼠 肠系膜微动脉和微静脉的口径、血流速度及毛细血管开放的数目；用ＢＴ８７—３型实验性体内血栓形成仪刺激颈动脉，观察 颈动脉血栓形成时间。结果：八味沉香胶囊１．２ｇ／ｋｇ、０．６ｇ／ｋｇ、０．３ｇ／ｋｇ连续给药１５天，可使大鼠体内血栓形成时间延长； 使大鼠肠系膜微动脉和微静脉的口径增大，肠系膜微动脉和微静脉的血流速度加快，毛细血管开放的数目增加。结论：八 味沉香胶囊具有明显的改善微循环、抑制血栓形成作用。 关键词：八味沉香胶囊；血栓；微循环；影响 中图分类号：Ｒ２９１．２ 文献标识码：Ｂ 文覃编号：１００６－６８１０（２０１０）０３—００４３—０２ 八味沉香胶囊是蒙药制剂八味沉香散的的改进剂型。 成都泰盟科技有限公司。 由沉香、肉豆蔻、丁香、广枣、木香等组成的，具有平息气血 ２方法与结果 相搏、止痛、补心益气之功效，用于气血相搏、心区疼痛、昏 ２．１八味沉香胶囊对大鼠肠系膜微循环的影响：取健康 厥、心悸、失眠、急躁不安、健忘症、癫痫等的治疗。本实验 大鼠５Ｏ只，体重１８０—２３０ｇ，雌雄各半，随机分为５组：第１ 拟观察八味沉香胶囊对大鼠血栓形成和微循环的影响，为 组，正常对照组，给予等容量生理盐水；第２组，阳性对照 其临床应用提供实验依据。 组，复方丹参片０．３ｇ／ｌ【ｇ（相当于临床治疗量）；第３—５组， １实验材料 八味沉香胶囊大、中、小剂量组，分别为１．２ｇ／ｋｓ（相当于临 １．１药物：八味沉香胶囊内容物（下称八味沉香），内蒙古 床治疗量的２倍）、０．６ｇ／Ｉ【ｇ（相当于临床治疗量）、０．３Ｓ／ｋＳ 蒙医学院药学院提供，批号０７０３１０，临用时充分研磨后用 （相当于临床治疗量的１／２倍）。各组均按２ｍＬ／１００ｇ灌胃 蒸馏水配成所需浓度的混悬液；复方丹参片，批号０６１２０７， 给药，连续１５天，在最后一次给药后２４小时，腹腔注射 安徽古井集团九方制药有限公司生产，临用时用充分研磨 ３％戊巴比妥钠麻醉，腹正中线切口１～２ｃｍ后，放入自动 后用蒸馏水配成所需浓度的混悬液。 恒温微循环观察箱内，轻轻取出被观察的肠系膜放入观察 １．２动物：Ｗｉｓｔａｒ大鼠，清洁级，雌雄兼有，由内蒙古大学 盒内，用任氏液灌流湿润肠系膜，通过ＢＩ￣２０００Ｅ医用图象 实验动物研究中心提供，许可证号ＳＣＸＫ（蒙）２ｏ０２－０００１。 分析仪观察记录大鼠肠系膜微动脉和微静脉的口径、血流 １．３主要仪器：ＢＴ８７—３型实验性体内血栓形成仪，包头 速度及毛细血管开放的数目。 医学院心血管研究室研制。ＢＩ一２０００Ｂ医用图象分析仪， 结果表明，八味沉香胶囊可使大鼠肠系膜微动脉和微 静脉的口径增大，使肠系膜微动脉和微静脉的血流速度加 △基金项目：内蒙古自然科学基金重点项目，编号２００５０８Ｄ１０９０ｃ２ 快，毛细血管开放的数目增加。详见表１。
